> Balita > Balita sa Industriya

Bakit unang nagli-lyse ang cell culture ng mga pulang selula ng dugo?

2022-12-23

Pangunahing pagpapakilala
Ang Erythrocyte lysate ay isa sa mga pinakasimple at madaling paraan upang alisin ang mga pulang selula ng dugo, iyon ay, upang hatiin ang mga pulang selula ng dugo na may lysate, na hindi nakakasira ng mga nucleated na selula at maaaring ganap na mag-alis ng mga pulang selula ng dugo. Ang lysate cleavage ay isang banayad na paraan ng pag-alis ng pulang selula ng dugo, na pangunahing ginagamit para sa paghihiwalay at pagdalisay ng mga selula ng tisyu na nadisperse ng enzyme digestion, ang paghihiwalay at paglilinis ng mga lymphocytes, at ang pag-alis ng mga pulang selula ng dugo sa mga eksperimento ng tissue protein at nucleic. pagkuha ng acid. Ang mga selula ng tisyu na nakuha ng lysate ng mga pulang selula ng dugo ay hindi naglalaman ng mga pulang selula ng dugo, at maaaring higit pang magamit para sa pangunahing kultura, pagsasanib ng cell, daloy ng cytometry, paghihiwalay at pagkuha ng nucleic acid at protina, atbp.

Mga tagubilin para sa paggamit
Sample ng tissue cell
1. Ang mga sariwang tissue ay natunaw ng pancreas/enzyme o collagenase at na-disperse sa single cell suspension, at ang supernatant ay itinapon sa pamamagitan ng centrifugation.

2. Kunin ang ELS lysate mula sa refrigerator sa 4â, idagdag ang ELS lysate sa cell precipitate sa ratio na 1:3-5 (magdagdag ng 3-5ml ng lysate sa 1ml ng cell compacted), dahan-dahang hipan at ihalo.

3. Centrifuge sa 800-1000rpm sa loob ng 5-8 minuto at itapon ang itaas na pulang malinaw na likido.

4. Ang namuo na bahagi ay nakolekta at na-centrifuge gamit ang Hank's solution o serum-free culture solution nang 2-3 beses.

5, kung ang pag-crack ay hindi kumpleto/kumpleto ay maaaring ulitin ang mga hakbang 2 at 3.

6. Resuspension cells para sa mga susunod na eksperimento; Kung ang RNA ay nakuha, pinakamahusay na gawin ito sa solusyon na inihanda mula sa Hakbang 4 gamit ang tubig ng DEPC

Ang mga pulang selula ng dugo ay may napakaikling siklo ng buhay, 120 araw lamang, ngunit napakabilis nilang nagpaparami ng dugo, at sa kasong ito ay partikular na may kakayahan ang mga ito sa paghahati ng selula, at sila ang pinakamabilis na naghahati ng mga selula sa lahat, kaya ang selulang ito ay napakahalaga, kaya ito ay lubhang kapaki-pakinabang para sa cell culture. Ito ay napaka-simple, wala itong anumang organelles sa loob nito, mga lamad ng cell at protina lamang.

Nakaraang:Ano ang mga function ng ELISA kit?

Susunod:Mga kinakailangan sa reagent at pangunahing representasyon ng konsentrasyon ng solusyon.